普通RIPA裂解液(組織/細胞)產品配有一支PMSF（100mM，1.5ml）

普通RIPA裂解液(組織/細胞)產品簡介：RIPA 組織/細胞裂解液是利用表面活性劑等來裂解細胞膜（包括核膜）。本試劑提取的蛋白為可溶性總蛋白。

使用說明 ：

如發現RIPA有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。

根據使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的終濃度為1mM，混勻備用 （PMSF現用現加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 5-10×105細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量) 。

用玻璃勻漿器勻漿，直充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

使用說明 ：

如發現RIPA有沉淀，請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。

根據使用量，取每1ml RIPA 加入10ul PMSF，使PMSF的終濃度為1mM，混勻備用 （PMSF現用現加）。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，用手指輕彈懸浮細胞以充分裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 5-10×105細胞/管，然后再裂解。

c)對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液

(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量) 。

用玻璃勻漿器勻漿，直充分裂解。

2、后處理：

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

 
參考文獻：
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo，Cai Li，Chunxiao Yang，Bing Li，Jie Wei，Yajun Lin，Peng Ye，Gang Hu，Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影響因子:1.851 PMID:29693190
《Gecko Active Components Regulates Endoplasmic Reticulum Stress to Induce the Apoptosis of KYSE150 Cells through PERK Pathway》 作者:Yimeng Duan, Lengxin Duan, Zeyue Huang, Bingbing Wang, Jiangang Wang 期刊:Journal of Biosciences and Life Sciences 影響因子:0.552 PMID:
《Long noncoding RNA ENST00000413528 sponges microRNA‐593‐5p to modulate human glioma growth via polo‐like kinase 1》 作者:Ren Zhang, Ruo‐Lun Wei, Wei Du, Li‐Wei Zhang, Tao Du, Ya‐Dong Geng, Xin‐ting Wei 期刊:CNS Neuroscience & Therapeutics 影響因子:4.458 PMID:30924320
《Glutamine Enhances the Hypoglycemic Effect of Insulin in L6 Cells via Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)/Protein Kinase B (AKT)/Glucose Transporter 4 (GLUT4) Signaling Pathway》 作者:Caijuan Wang, Yujiao Deng, Yenan Yue, Wenting Chen, Yu Zhang, Guifang Shi, and Zhongming Wu 期刊:Medical Science Monitor 影響因子:1.98 PMID:29491345
《Sphingomyelin synthase 2 promotes H2O2-induced endothelial dysfunction by activating the Wnt/β-catenin signaling pathway》 作者:Panpan Zhang,Lingyue Hua,Huan Hou, Xingyue Du,Zhiqiang He, Menghan Liu, Xiaojuan Hu, Nianlong Yan 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影響因子:2.928 PMID:30272329
《Downregulation of transcription factor EB inhibits the growth and metastasis of colorectal carcinomas》 作者:Jin-Zhe Chang,Shu-Dong Chen,Hui Zheng,Hua-Ping Zhang 期刊:European Journal of Inflammation 影響因子:0.733 PMID: